Avaliação de “time-kill” do produto Sal CURB® RM Extra, na dosagem de 2kg/t. sobre Enterobacteriaceae e Salmonella typhimurium em condições in vitro

Um dos patógenos mais comuns encontrados em espécies animais é a Salmonella spp., uma enterobactéria Gram-negativa. Seu controle deve ser estabelecido o quanto antes na cadeia produtiva de alimentos, desde as matérias primas destinadas a produção de alimentos para animais.

Medidas de controle em fábricas de farinhas, esmagadoras de farelo de soja e fábricas de rações são fundamentais para a segurança microbiológica do alimento, assegurando a saúde intestinal dos animais e das pessoas que se alimentam de produtos de origem animal.

O Sal CURB® RM Extra Líquido é um aditivo conservante desenvolvido pela Kemin, a base de formaldeído e ácidos orgânicos, combinação sinérgica que entrega uma rápida resposta, ao mesmo tempo que busca acidificar e estabilizar o meio.

Avaliar a eficácia de protótipos do produto Sal CURB® RM Mill na inativação de Enterobacteriaceae e S. typhimurium em condições in vitro, considerando-se dosagem mínima, em diferentes tempos.

O ensaio foi realizado em laboratório para avaliação da inativação de patógenos com o produto Sal CURB® RM Extra, em água deionizada estéril frente a pool de enterobactérias e S. typhimurium isolados de campo, frente ao controle positivo e ao produto Sal CURB RM Extra, ao longo do tempo.

Desafio:

Enterobacteriaceae (EB) e S. typhimurium (ST) na concentração de 1 x 105 UFC/g (unidades formadoras de colônia por grama de amostra), culturas isoladas de campo.

Os produtos foram diluídos em água deionizada estéril em diferentes concentrações conforme apresentado na Tabela 01.

Após feitas as diferentes diluições, estas foram distribuídas em tubos estéreis (9 mL) e em seguida adicionou-se 1 mL das culturas teste na concentração de 1 x 105 UFC/mL. Em seguida os meios foram homogeneizados e deixados em contato por 1h, 6h e 24h (produto x bactéria), em temperatura ambiente.

Na Tabela 02 é apresentada a descrição dos tratamentos.

Após os tempos de contato foram realizadas diluições seriadas, semeadas pela técnica de pour plate em Agar PCA (Agar padrão para contagem). As placas foram incubadas a 36 ±1ºC por 48h.

Nas mesmas condições dos procedimentos acima foram realizados o controle positivo para as culturas em teste (EB e ST),deixando-as em contato com água destilada estéril por tempo de teste estabelecido (1, 6 e 24 horas). Todas as análises foram realizadas em triplicata.

Os resultados da contagem de Enterobacteriaceae e S. tiphymurium em UFC/g após tempos de contato, bem como a média da triplicata e o pH do meio, são apresentados nas Tabelas 03 e 04, conforme abaixo.

Os resultados acima demonstram que no tratamento com o produto Sal CURB® RM Extra, tanto para EB quanto para ST, houve uma acentuada acidificação do meio e, embora o valor mínimo de pH de crescimento (pHmin) seja variável, as salmonelas dificilmente conseguem crescer e se desenvolver em ambientes com valores de pH inferiores a 4,0, induzindo sua perda de viabilidade (morte celular)4 

Foi possível verificar uma resposta rápida e eficaz sob EB, reduzindo 2 logs de contaminação logo após 1h de contato com a cultura, alcançando 4 logs de redução com 24h de contato, comparando-se frente ao CP, que não recebeu nenhum tratamento.

Para ST a melhor resposta também ocorreu entre 6 e 24h, reduzindo os 4 logs de contaminação logo após 6h de contato com a cultura, alcançando ausência de salmonella spp. com 24h de contato, comparando-se frente ao CP, que não recebeu nenhum tratamento.

Com base nos resultados demonstrados neste ensaio, foi possível verificar que o produto Sal CURB® RM Extra se mostrou eficaz no controle e redução de contaminação por Enterobacteriaceae e S. tiphymurium, na dosagem de 2,0 kg/t, no período de até 24 horas. O produto se apresenta como uma ferramenta importante no controle em fabricas de rações, esmadagoras de farelo de soja, bem como terminais marítimos, ferroviários ou rodoviários de unidades que necessitam de uma rápida resposta microbiológica a um custo-benefício viável e possuem restrição a utilização do formaldeido.