Turnover carbono-13 frangos

A técnica dos isótopos estáveis pode ser utilizada como metodologia envolvendo a variação natural do carbono-13 tecidual ou corporal para avaliar a qualidade da dieta e a eficiência com que é utilizada pelos animais. Essa metodologia pode ser considerada apropriada para avaliar a substituição do carbono tecidual, fornecendo diretamente o turnover, em vez de taxas de síntese e degradação separadamente (Zuanon et al., 2007).
O turnover de componentes corporais e órgãos de animais adultos podem ser mensurados por dietas com assinaturas isotópicas contrastantes (Gannes et al., 1998). Após a mudança da dieta, a alteração da composição isotópica no tecido ou corpo depende da velocidade com que esses constituintes são substituídos.
Durante o crescimento de frangos de corte, produz-se um incremento rápido no início, diminuindo com o passar do tempo até atingir o pleno desenvolvimento do tecido, quando então se torna nulo (Macari et al., 2002).
A maioria dos estudos tem utilizado animais adultos na determinação de turnover para evitar erros de interpretações causadas pelo fator crescimento, pois o acréscimo de massa tecidual é o principal fator na velocidade de diluição isotópica do carbono (turnover isotópico) em relação ao turnover metabólico para animais em crescimento (Zuanon et al., 2007).
O objetivo foi avaliar o turnover do carbono-13 pela substituição de dieta composta de grãos do ciclo fotossintético C₄ por dieta composta de grãos do ciclo fotossintético C₃ no plasma de três linhagens de frango tipo colonial com potencial genético de crescimentos lento, médio e rápido.

Em galpão experimental da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia UNESP - Campus de Botucatu-SP, foram alojados 900 pintos de corte com três linhagens de frango tipo colonial, sendo uma de crescimento rápido (Máster Griss), uma de crescimento intermediário (Vermelhão Pesado) e uma de crescimento lento (Label Rouge), criadas em sistema intensivo. As aves foram distribuídas em delineamento em blocos casualizados com 6 tratamentos e 4 repetições, com água e ração fornecidas ad libitum, durante todo o período experimental.
Os pintainhos foram obtidos de matrizes que estavam recebendo dietas compostas predominantemente por grãos de plantas do ciclo fotossintético C₄. Ao nascerem, estes devem possuir em seus tecidos corporais sinais isotópicos de carbono-13 semelhantes ao destas dietas. Após o alojamento as aves foram alimentadas com dieta contendo predominantemente grãos do ciclo C₄ para dar início à troca de sinal do tecido corporal.
Para as análises isotópicas, foram tomados aleatoriamente 4 aves por tratamento nos dias 0, 1, 2, 3, 5, 8, 11, 14 e 21 dias de idade. Para realização dessas análises, as amostras de plasma foram descongeladas, e analisadas na forma líquida adicionando-se 0,3 μl em cápsulas de estanho para determinação das razões isotópicas de carbono em espectrômetro de massa DELTA-S (Finnigan Mat) acoplado ao Analisador Elementar (EA 1108 CHN), de acordo com a equação d¹³C_{(amostra, padrão)} = [(R_amostra/R_padrão)- 1] x 10³, onde: d¹³C = enriquecimento relativo da razão ¹³C/¹²C da amostra em relação ao padrão PDB. R = razão isotópica (¹³C/¹²C) da amostra e do padrão.
Para mensurar o turnover isotópico do carbono (diluição isotópica) nos tecidos em um determinado intervalo de tempo pelo método de equações exponenciais de primeira ordem do softwareOrigin^® 6.0 Professional (Microcal Software, 1999), foi empregada a função exponencial do tempo expressa pela equação d¹³C(t) = d¹³C (f) + [d¹³C (i) - d¹³C(f)]e^-kt, onde: d¹³C(t) = enriquecimento isotópico do tecido em qualquer tempo (t); d¹³C(f) =enriquecimento isotópico do tecido no patamar de equilíbrio, ou condição final; d¹³C(i) = enriquecimento isotópico do tecido, na condição inicial; k = constante de troca (turnover) em dia^-1; t = tempo (em dias) a partir da substituição da dieta.
A meia-vida do ¹³C para o tecido muscular, na condição de 50% da condição inicial e 50% da condição final, em t= T, será calculada pela equação T = ln 2/k, onde: T = meia-vida, em tempo (dias); ln = logaritmo niperiano; k = constante da taxa de turnover no tecido, em dia^-1.

Os valores médios do d¹³C em função do tempo, a meia vida e suas respectivas equações, para o sangue das diferentes linhagens de frango de corte tipo colonial podem ser observadas nas Figuras 1, 2 e 3. A análise dos resultados de d¹³C do sangue dos frangos da linhagem Pescoço pelado (crescimento lento) resultou na equação d¹³C= -25,72 - 2,03 e^-0,5873t com meia vida do carbono calculada de 1,42 dias, para os frangos da linhagem Vermelhão pesado (crescimento médio) a equação obtida foi: d¹³C= -25,57 - 2,80 e^-0,3532t com meia vida do carbono de 1,96 dias, e para os frangos da linhagem Master Griss (crescimento rápido) a equação obtida foi: d¹³C= -25,84 - 2,34 e^-0,4204t com meia vida do carbono de 1,64dias.

Figura 1. Curvas de diluição isotópica do carbono (média ± desvio-padrão, n = 4) e valores de meia vida (em dias) do sangue frangos da linhagem Pescoço pelado

 Figura 2. Curvas de diluição isotópica do carbono (média ± desvio-padrão, n = 4) e valores de meia vida (em dias) do sangue frangos da linhagem Vermelhão Pesado

Figura 3. Curvas de diluição isotópica do carbono (média ± desvio-padrão, n = 4) e valores de meia vida (em dias) do sangue frangos da linhagem Master Griss

Verifica-se que o valor meia vida encontrado para a linhagem Pescoço Pelado foi o menor (1,42dias) indicando que esta linhagem teve troca mais rápida de carbono-13, o que não era esperado por se tratar de uma linhagem de crescimento lento. Para a linhagem Vermelhão Pesado, o valor de meia vida foi o maior (1,96 dias) indicando troca mais lenta de carbono-13 podendo representar crescimento mais lento entre as três linhagens contra firmando o pré-determinado que era o de crescimento médio. Para a linhagem Master Griss o valor de meia vida foi o intermediário (1,64 dias) podendo representar crescimento médio entre estas três linhagens. Esses interessantes resultados, além de evidenciarem uma inversão entre as linhagens Pescoço Pelado, Master Griss e Vermelhão Pesado no que se refere à velocidade de crescimento, também servirão de base, contribuindo para a realização de outros estudos envolvendo a técnica dos isótopos estáveis para a rastreabilidade.

A utilização dos isótopos estáveis em pesquisas na área da nutrição animal é uma ferramenta eficiente para o entendimento do metabolismo animal.

À FAPESP pelo financiamento do projeto Temático nº 2008/57411-4, do qual este estudo faz parte. Pela bolsa de doutorado concedida Processo n° 2010/51717-4.

Gannes LZ, Del-Rio CM, Koch P. 1998. Natural abundance variations in stable isotopes and their potential uses in animal physiological ecology. Comparative Biochemistry and Physiology 119A(3)725-737.

Macari M, Furlan RL, Gonzales E, Sartori JR. 2007. Fisiologia aviária aplicada a frangos de corte. In: Crescimento e metabolismo muscular. Jaboticabal, FUNEP:UNESP :279-297.

Zuanon JAS et al. 2007. Muscle delta ¹³C change in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) fingerlings fed on C₃ or C₄ cycle plants grain-base diets. Comparative Biochemistry and Physiology 147:761-765.