Ensaio com frangos de corte na Schothorst Feed Research confirma o parecer científico da EFSA de 2018 sobre fontes de metionina e valida a abordagem experimental
Conclusões
Os resultados deste estudo realizado na Schothorst Feed Research demonstraram uma biodisponibilidade média de MHA-FA e DLM65 diluído de 65% e 61%, respectivamente, em comparação com o MetAMINO®, considerando os parâmetros de desempenho e de carcaça.
Estes resultados demonstram que a biodisponibilidade relativa (BR) do MHA-FA é significativamente menor que seu conteúdo ativo de 88%, conforme o parecer científico de 2018 da EFSA de 66% em base de produto (75% em base equimolar).
A biodisponibilidade relativa média de 61% da DLM65 foi próxima do valor esperado de 65% (devido à diluição para 65% de pureza), confirmando que a abordagem dose-resposta simultânea é adequada para determinar a biodisponibilidade relativa de fontes de nutrientes.
Introdução e objetivo
As dietas comerciais avícolas são rotineiramente suplementadas com fontes de metionina (Met) para atender com precisão às especificações de Met+Cys. Cerca de dois terços do mercado global utilizam DL-metionina (DLM) e um terço, produtos hidroxianálogos de DL-metionina, principalmente na forma líquida de ácido livre (MHA-FA). Embora a DLM seja a fonte de Met mais utilizada em todo o mundo, a questão do valor nutricional ser caracterizado pela biodisponibilidade relativa do MHA-FA líquido – ou, em outras palavras, a taxa de substituição desses produtos na ração – é sempre um fator crítico na tomada de decisão de compra e na otimização dos custos da ração.
Várias revisões da literatura relatam uma biodisponibilidade relativa de cerca de 65% para o MHA-FA líquido em comparação com a DLM em frangos de corte em base na comparação produto a produto (Jansman et al., 2003; Sauer et al., 2008; Lemme et al. 2012). Recentemente, a Autoridade Europeia para a Segurança dos Alimentos (EFSA, 2018) divulgou um parecer científico sobre o MHA-FA líquido e seu sal de cálcio, confirmando uma biodisponibilidade relativa de 75% em base equimolar, o que é equivalente a 66% para o MHA-FA líquido em base produto a produto. Embora esta biodisponibilidade relativa de 65% dos produtos MHA em relação à DLM tenha sido questionada e confirmada em diversos experimentos de campo e em universidades (Hoehler et al., 2005; Lemme et al., 2012; Sangali et al. 2014), a abordagem experimental para determiná-la foi discutida recentemente por Vazquez-Anon et al. (2006) e Agostini et al. (2016). A fim de fornecer comprovação adicional de que a metodologia de ensaios de dose-resposta com fornecimento simultâneo não só é válida, como também é a metodologia de escolha, pode ser incluído na dieta um produto cuja biodisponibilidade relativa é conhecida a priori. A diluição de DLM com amido, por exemplo, até uma pureza de 65% (65 partes de DLM, 35 partes de amido – DLM65) resultaria em um produto cuja biodisponibilidade relativa seria considerada próxima de 65% devido à sua diluição. Embora vários experimentos utilizando esta abordagem em aves já tenham sido publicados (Lemme et al., 2002; Hoehler et al., 2005, Elwert et al., 2008), são necessários dados para linhagens modernas de frangos de corte. Portanto, foi realizado um estudo na Schothorst Feed Research, Holanda, para com dois principais objetivos: 1- Determinar a biodisponibilidade relativa do MHA-FA em relação ao MetAMINO® (DLM), usando parâmetros convencionais de desempenho. 2- Validar a adequação da análise de regressão multiexponencial para estimar a biodisponibilidade relativa e através da inclusão de DLM diluído a 65% (DLM65) como padrão interno.
Materiais e Métodos
No total, 1.920 frangos Ross 308 machos de um dia de idade foram distribuídos em 96 boxes sobre o piso, com 20 aves cada. Cada box (2m2) foi equipado com um comedouro, uma linha de bebedouros nipple e maravalha como material de cama. A temperatura ambiental foi gradualmente diminuída de 34°C ao alojamento para 20°C aos 35 dias de idade. A luz permaneceu ligada nas primeiras 24 horas para dar às aves a oportunidade de encontrar facilmente ração e água. Depois disso, foi aplicado um programa de luz de 22L: 2E por um dia e de 8L:4E:10L:2E durante o período experimental restante, de acordo com a legislação da UE de um mínimo de seis horas de escuro a partir do segundo dia. As dietas foram formuladas para atender ou exceder o perfil ideal de AA do AMINOChick® 2.0, exceto para Met e Met+Cys digestíveis. Os ingredientes principais foram analisados pelo AMINONIR® e os resultados utilizados para a formulação das rações. A alimentação foi dividida nas fases inicial (d 0-11), de crescimento (d 11-28) e de terminação (d 28-35). Em cada fase, foram aplicados 16 tratamentos dietéticos, incluindo uma dieta basal deficiente em Met+Cys dig. sem suplementação de Met e 5 níveis crescentes de MetAMINO®, MHA-FA e DLM65. O amido foi usado para diluir o MetAMINO® a um teor de Met de 65% para formar a DLM65. As fontes Met foram adicionadas em todas as fases com base em peso/peso a 0,40; 0,80; 1,20; 2,10 e 3,00 g/kg (Tabela 1). As rações iniciais foram produzidas na forma triturada, enquanto que as de crescimento e de terminação foram peletizadas (3,0 mm). A salinomicina foi adicionada às rações iniciais e de crescimento como agente anticoccidiano e as rações de terminação não continham coccidiostáticos. Foram fornecidas ração e água à vontade durante todo o período experimental.
Resultados
Os valores analisados das dietas experimentais de todas as fases foram muito próximos aos valores calculados (Tabela 2). As taxas de recuperação variaram de 97 a 109% para Met+Cys e Lys totais. A alta precisão dos resultados analíticos foi obtida através da formulação das rações com base nos valores analisados dos ingredientes principais (AMINONIR®) e da fabricação das rações em uma fábrica especializada de pesquisa, com precisão de dosagem e qualidade de mistura confirmadas. Portanto, os níveis calculados de inclusão dos produtos de Met foram utilizados para determinações da
biodisponibilidade relativa.
Níveis crescentes de MetAMINO®, MHA-FA e DLM65 melhoraram o desempenho (Tabela 3) e os rendimentos de carcaça e de peito (Tabela 4) em comparação com a dieta basal. Em relação à dieta basal, a maior inclusão de Met (3,00 g/kg) melhorou o GMD em 70, 67 e 70% e reduziu a conversão alimentar em 22, 22 e 23% para MetAMINO®, MHA-FA e DLM65, respectivamente. Da mesma forma, o RC melhorou em 13, 11 e 13%, o R em 62, 60 e 63% e o RCP-RC em 43, 43 e 45% com a inclusão de MetAMINO®, MHA-FA e DLM65, respectivamente. Essas respostas relativas confirmam que os principais pré-requisitos para a determinação adequada da biodisponibilidade relativa foram atendidos com êxito, incluindo: 1) um ponto de partida comum (a dieta basal) foi claramente deficiente em Met+Cys, 2) três ou mais níveis de suplementação de cada produto testado, cujos pontos de dados estavam na faixa sensível (curvilinear) da curva de resposta e 3) todos os produtos apresentaram um platô comum, que foi confirmado pelas diferenças não significativas entre as fontes de Met para todos os parâmetros de desempenho no maior nível de inclusão de Met. Este último ponto também indica que podem ocorrer interpretações incorretas da biodisponibilidade de fontes de Met se a comparação entre as fontes for feita apenas na parte assintótica da curva. Nesse nível, não são esperadas melhorias adicionais com o aumento de inclusão de Met (lei dos lucros cessantes), levando a conclusões incorretas e onerosas. Com esta abordagem, os dados deste estudo sugerem que a DLM diluída até 65% de pureza tem a mesma
eficácia que o MetAMINO® com 99% de pureza, o que, evidentemente, não está correto. Para superar esta limitação, ensaios dose-resposta com análise de regressão multiexponencial subsequente têm sido muito utilizados para determinar a biodisponibilidade de fontes não só de Met, mas também de diferentes fontes de nutrientes (p. ex., P, Se, Fe e Lys).
Biodisponibilidade relativa
As respostas de desempenho e rendimento de carcaça aos níveis crescentes de MetAMINO®, MHA-FA e DLM65 são mostradas nas Figuras 1 e 2, respectivamente. A análise de regressão multiexponencial revelou que a eficiência do MHA-FA foi de apenas 58, 66 e 62% em relação ao MetAMINO® para ganho de peso, conversão alimentar e FEEP (fator europeu de eficiência de produção), respectivamente. Da mesma forma, as biodisponibilidades relativas estimadas da DLM65 foram de 56, 54 e 59 para ganho de peso, conversão alimentar e FEEP. Com base nas características de carcaça, a eficácia do MHA-FA foi estimada em apenas 63, 65 e 73% em relação ao MetAMINO® para RCa, RCP-PC e RCP-PCa. Correspondentemente, as biodisponibilidades estimadas da DLM65 foram de 58, 65 e 73% para os mesmos parâmetros.
Como resumido na Tabela 5, todas as estimativas de biodisponibilidade relativa foram significativamente (P <0,05) menores que 88%, que é o teor da substância ativa no MHA-FA. Com base em todos os parâmetros avaliados, a biodisponibilidade relativa média do MHA-FA e da DLM65 em comparação com ao MetAMINO® foi de 65% e 61%, respectivamente. Além disso, as estimativas correspondentes do MHA-FA líquido e da DLM65 para os critérios de desempenho não foram diferentes, sugerindo valor nutricional semelhante. A biodisponibilidade relativa média de 61% da DLM65 foi próxima do valor esperado de 65% (devido à diluição a 65% de pureza), confirmando que a abordagem dose-resposta simultânea é adequada para determinar a biodisponibilidade relativa de fontes de nutrientes. Além disso, os resultados deste estudo estão de acordo com os achados anteriores de Lemme et al. (2002), Hoehler et al. (2005) e Elwert et al. (2008) e, portanto, confirmam a adequação da abordagem experimental, bem como a biodisponibilidade relativa determinada para o MHA-FA líquido.
Conclusões
Esses resultados demonstram que a biodisponibilidade relativa do MHA-FA é significativamente menor que seu conteúdo ativo de 88% e próximo a 65%, de acordo com publicações anteriores. A inclusão da DLM65 diluída confirmou que a análise de regressão multiexponencial é uma abordagem válida para estimar a biodisponibilidade de fontes de Met e resultou em uma biodisponibilidade relativa similar (61 vs. 65%) à do MHA-FA líquido.