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Efeito dos adsorventes sobre o desempenho de Juvenis de Jundiá (Rhamdia quelen) alimentados com dietas contaminadas com aflatoxinas

Publicado: 5 de julho de 2013
Por: Paulo Rodinei Soares Lopes, Zootecnista, Doutor, Universidade Federal do Pampa -UNIPAMPA-, RS; Juvêncio Luis Osório Fernandes Pouey, Médico Veterinário, Doutor, Professor Adjunto, Departamento de Zootecnia -UFPel-, RS; Dariane Beatriz Schoffen Enke, Engenheira de Alimentos, Doutoranda em Zootecnia, UFPel, RS; Carlos Augusto Mallmann, Medico Veterinário, Doutor, Professor Titular, Departamento de Medicina Preventiva, Universidade Federal de Santa Maria -UFSM-, RS, e outros.
Sumário

Avaliou-se os efeitos das afl atoxinas e de dois adsorventes (Alumíniossilicato ASSCA e Glucomanano GM)) no desempenho zootécnico de juvenis de jundiá (Rhamdia quelen). Utilizou-se 189 peixes com peso inicial de 43,13 g, criados em sistema de recirculação de água termo regulada, durante 60 dias As toxinas e os adsorventes foram incluídos na ração nos seguintes níveis: ração sem ADS: (T0 - controle; T1 - 50 μgAFkg-1; T2 - 100 μgAFkg-1); ração + 0,3% ASSCA: (T0- controle; T1- 50 μgAFkg-1; T2- 100 μgAFkg-1); ração + 0,3% GM: (T0- controle; T1- 50 μgAFkg-1; T2- 100 μgAFkg-1). Os resultados demonstraram que a ação negativa das afl atoxinas, reduziu signifi cativamente o ganho de peso, biomassa fi nal, ganho médio diário e taxa de crescimento específi co dos juvenis de jundiá, proporcionalmente aos níveis crescentes de afl atoxinas na dieta, em relação ao tratamento controle, sem apresentar mortalidade. Concluiu-se que os alevinos de jundiá, alimentados com afl atoxinas na dieta foram susceptíveis aos efeitos negativos, com grandes perdas no crescimento e ganho de peso. A adição de 0,3% de glucomanano na dieta neutralizou os efeitos negativos das afl atoxinas.

Palavras-chave: micotoxina, aluminosilicato, glucomanano, nutrição, jundiá.

INTRODUÇÃO
A piscicultura brasileira evoluiu muito na última década e o seu crescimento é decorrente, sobretudo, dos avanços nutricionais, genéticos e de manejo nas diferentes fases de vida dos peixes. Em um sistema que busca aprimoramento nas formulação e composição de uma dieta devidamente equilibrada em energia e proteína, qualquer fator que afete negativamente a produção, determina enormes prejuízos. Desta forma, deve-se ressaltar a importância dos contaminantes naturais dos alimentos, como as micotoxinas, as quais podem acarretar perdas consideráveis na criação de peixes.
As micotoxinas são compostos quimicamente tóxicos produzidos por diversos fungos, particularmente por espécies de Aspergillus, Fusarium, Penicillium, Claviceps e Alternaria. As mais comuns são as aflatoxinas, ocratoxina A, tricotecenos, zearalenona e fumonisinas. Foi verificado que a contaminação por micotoxinas pode afetar cerca de 25% da produção de grãos no mundo a cada ano (CANOVI et al., 2003).
O consumo de dietas contaminadas por micotoxinas pode induzir efeitos agudos e crônicos, resultando em teratogênese, carcinogênese, impactos estrogênicos ou imunossupressivos, não somente em animais, mas também no homem, ao passo que usualmente os animais sofrem mais devido ao consumo de grãos de baixa qualidade. Nos animais, as dietas contaminadas por micotoxinas podem levar a outras consequências, como recusa alimentar, piora na conversão alimentar, diminuição de ganho de peso, aumento na incidência de doenças devido a imunossupressão e interferência na capacidade reprodutiva, que são responsáveis por grandes perdas econômicas.
As aflatoxinas (AFs) constituem um grupo de toxinas produzidas pelo fungo Aspergillus flavus e Aspergillus parasiticus e são identificadas como B1, B2, G1 e G2. As letras B e G devem-se ao fato destas apresentarem fluorescência azulada e esverdeada, respectivamente, quando observadas sob luz ultravioleta. Conforme Mallmann et al. (1994), existem atualmente mais de 400 micotoxinas que causam severos prejuízos.
Para evitar as micotoxicoses nos animais, algumas estratégias são utilizadas, que podem ser divididas em métodos químicos, físicos e biológicos. Entretanto, a melhor forma de evitar a contaminação de micotoxinas nos grãos é a prevenção de sua formação, por exemplo: ceifar o grão em maturidade e com baixa umidade e armazenar em condições refrigeradas e secas. Porém, a execução de tais medidas é difícil em países com clima úmido e quente.
De acordo com Dilkin (2002) os consumos em doses moderadas à baixas, causam aflatoxicose crônica, desencadeando graves problemas imunossupressivos, perda de ganho de peso e de crescimento.
Os efeitos tóxicos das aflatoxinas são dependentes da dose e do tempo de exposição, determinando assim intoxicações aguda e crônica. A síndrome tóxica aguda ocorre pela ingestão de alimento com alta concentração de aflatoxina, sendo os efeitos observados em curto espaço de tempo, perda de apetite, hepatite aguda, hemorragias e morte (ROSMANINHO et al., 2001). Quando as micotoxinas são ingeridas os diversos efeitos devem as suas diferentes estruturas químicas, influenciadas pelo fato de serem ingeridas por diferentes organismos animais superiores e também pela diversidade de espécies, raça, sexo, idade, fatores ambientais, manejo, condições nutricionais e outras substâncias (DILKIN, 2002).
O processo físico, através do uso de adsorventes misturados a rações é o mais utilizado atualmente. Os materiais adsorventes, não nutritivos, se unem à micotoxina no trato gastrintestinal, diminuindo a biodisponibilidade da micotoxina e associações tóxicas. Os adsorventes mais eficientes são aqueles que conseguem adsorver o maior número de micotoxinas diferentes. Dentre todos esses métodos de descontaminação, a utilização de adsorventes ligados a micotoxina é o caminho mais aplicado para proteger animais contra os efeitos prejudiciais das rações contaminadas com as toxinas fúngicas (HUWIG et al., 2001).
Os compostos de aluminosilicato de sódio e cálcio (ASSCA) na concentração de 0,5% na ração têm apresentado um resultado positivo na diminuição dos efeitos adversos de aflatoxinas em varias espécies. Diversos experimentos demonstraram também que a bentonita sódica é um ótimo adsorvente para aflatoxinas em aves, da mesma maneira que os ASSCA (MALLMANN et al., 2007). O glucomanano (GM), outro adsorvente bastante utilizado, é um polímero extraído da parede celular de leveduras. Estudos realizados por Swamy et al. (2002) investigaram os efeitos do GM adicionado na dieta e observaram um aumento na ingesta e redução da atividade da gamaglutamil-transferase, um indicador de danos hepáticos, reduzindo o efeito da toxina, favorecendo o ganho de peso e crescimento. O cultivo do jundiá (Rhamdia quelen) vem crescendo progressivamente no sul do Brasil, devido ao interesse das instituições de pesquisas. É uma espécie nativa de grande representatividade e interesse econômico, apresenta excelente adaptabilidade a diferentes ambientes, sendo amplamente utilizada na piscicultura. Além disso, possui boa aceitação pelo mercado consumidor (GOMES et al., 2000).
Muitos são os efeitos negativos na produtividade de peixes causados por aflatoxinas no desenvolvimento dos animais durante o período de cultivo, sendo que a perda ao final é irreparável, contribuindo para o insucesso da criação. Portanto torna-se imperativo a continuidade a esse tipo de investigação para buscar resultados mais conclusivos, principalmente pela ação do adsorvente no desenvolvimento dos peixes.
Portanto, visando à utilização de uma espécie nativa e adaptada às condições climáticas da região sul no estado do Rio Grande do Sul, o presente trabalho teve como objetivo testar diferentes níveis de aflatoxinas (AFs) e dois tipos de adsorvente (ASSCA e GM) em rações para juvenis de jundiá (Rhamdia quelen) avaliando seu efeito no desempenho zootécnico.
 
MATERIAL E MÉTODOS
O trabalho foi conduzido no Laboratório de Ictiologia do Departamento de Zootecnia da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel da Universidade Federal de Pelotas. O experimento deu-se no período de outubro a dezembro de 2007, com duração de 60 dias.
Foram utilizadas 27 caixas de polipropileno com capacidade de 250 L, abastecidas com 200 L de água, num sistema de criação fechado e termo regulado. O sistema tem capacidade de 20000 L de água, abastecida através de um reservatório externo com água proveniente de um poço artesiano. Manteve-se a circulação da água nas unidades experimentais com um volume de 1,3 L/min, durante as 24 horas do dia.
Para o experimento utilizou-se 189 juvenis de jundiá (Rhamdia quelen) com peso médio de 43,13 g, obtidos através de reprodução induzida a partir de matrizes do próprio setor (UFPel), criadas em tanque de terra, alimentadas com ração comercial contendo 45% de proteína bruta, além do plâncton originado pela adubação.
Todos os peixes foram submetidos a um jejum de 24 horas antes de iniciar o experimento. Após este período selecionou-os, para que fossem realizadas as biometrias iniciais (peso e comprimento). A densidade de estocagem foi de 7 juvenis por unidade experimental.
A alimentação foi ministrada duas vezes ao dia (9 e 16 horas), na proporção de 5% da biomassa. Ajustou-se a taxa de arraçoamento quando da realização da biometria mensal por unidade experimental, com reposição dos mesmos. Diariamente efetuou-se a limpeza das caixas, através de sifão, retirando-se os resíduos existentes nas mesmas, sendo contabilizada a eventual mortalidade. A troca diária de água foi na ordem de 5%, observando-se a necessidade de sifonagem dos dejetos e resíduos das rações.
Calculou-se a dieta dos peixes de acordo com Coldebella; Radünz Neto (2002), na qual foram incluídos os níveis de aflatoxinas (AFs) e dos adsorventes (ADS) comforme os tratamentos (Tabela 1). Os ADS adicionados nas dietas dos alevinos foram: Aluminosilicato de cálcio e sódio (ASSCA) e o Glucomanano (GM). As dietas experimentais foram isoprotéicas e isocalóricas, contendo 35,2% proteína bruta e 3444 kcal kg-1 de energia digestível.
Tabela 1. Formulação e composição da ração experimental para jundiá (Rhamdia quelen), Pelotas-RS, 2007.
Efeito dos adsorventes sobre o desempenho de Juvenis de Jundiá (Rhamdia quelen) alimentados com dietas contaminadas com aflatoxinas - Image 1
As rações eram preparadas no laboratório de Ictiologia do Departamento de Zootecnia. Os tratamentos avaliados incluíam diferentes níveis de aflatoxinas, as quais foram produzidas no Laboratório de Análises Micotoxicológicas - LAMIC-UFSM, certificado pelo INMETRO e pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, através da fermentação de arroz parbolizado com uma cepa do fungo Aspergillus parasiticus. O arroz previamente esterilizado, e após ter sido inoculado era adicionado a um erlenmayer e colocado em agitador orbital com controle de temperatura pelo período de 6 dias.
Os ingredientes utilizados na ração experimental estavam isentos de contaminação natural e analisados no LAMIC-UFSM, somente após rigoroso teste por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Esse cuidado se explica por tratar-se de inclusão artificial de aflatoxinas na dieta, sem que haja interferência de toxinas do próprio alimento. O pó de arroz fermentado (contendo aflatoxinas) foi acrescido à ração dos peixes, após uma prévia mistura com farelo de milho, que em seguida misturou-se aos demais ingredientes da ração em um misturador mecânico com capacidade para 5 kg, após este procedimento a ração foi peletizada e levada a estufa a 50ºC (48 h), após o processamento manteve-se em lugar seco, escuro e resfriado para evitar qualquer tipo de aparecimento e proliferação de outros fungos. Uma fração de cada tratamento enviou-se para o LAMIC -UFSM para nova análise, após obter a confirmação da quantidade de toxina, acrescentadas nas dietas. As aflatoxinas e os adsorventes na ração nos seguintes níveis: ração sem ADS: (T0 - controle; T1 - 50 μgAFkg-1; T2 - 100 μgAFkg-1); ração + 0,3% ASSCA: (T0- controle; T1- 50 μgAFkg-1; T2- 100 μgAFkg-1); ração + 0,3% GM: (T0- controle; T1- 50 μgAFkg-1; T2- 100 μgAFkg-1).
Ao final do período experimental, após jejum de 24 h, submeteram-se os peixes à biometria para determinação das seguintes variáveis: - Peso médio final, crescimento (comprimento total e padrão), ganho de peso diário (peso fi nal - peso inicial/período experimental), biomassa (peso médio final - peso médio inicial x número de final de peixes), rendimento de carcaça (peso do peixe eviscerado x 100/peso fi nal), taxa de crescimento específico (100 x ((In peso fi nal – In peso inicial)/ dias)) e sobrevivência.
Para a avaliação do rendimento de carcaça retirou-se uma amostra de 10 peixes de cada tratamento ao final do experimento. Para esta determinação utilizou-se bisturi e tesoura, sendo que o corte para a retirada das vísceras foi feito em toda linha ventral, retirando-se as vísceras e brânquias. Determinou-se o rendimento da carcaça, através do cálculo do peso total dos peixes menos o peso das vísceras, expresso em percentagem, conforme descrito por Melo et al. (2002).
Também monitorou-se diariamente (09:00 e às 16:00 h) os parâmetros da qualidade da água nas unidades experimentais (O2D, amônia total, alcalinidade, pH e temperatura) com auxílio de um oxímetro digital e kit colorimétrico.
O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com três níveis de aflatoxinas, dois adsorventes distintos (ASSCA e GM), e três repetições cada. Os resultados foram submetidos à ANOVA, para comparação entre as médias o teste de Tukey (5%) e análise de contrastes. Utilizou-se o programa estatístico SAS (1997) para analises dos resultados observados.
 
RESULTADOS E DISCUSSÃO
As condições ambientais foram uniformes entre os tratamentos, tendo em vista a utilização do sistema de recirculação fechado termo-regulado, não interferindo nos resultados. Os valores obtidos para temperatura da água: (23,6±3,5ºC), oxigênio dissolvido: (5,4±1,5 mgL-1), amônia total: (0,5±0,1 mgL-1), alcalinidade: (55±6,2 mgL-1) e pH (7,7±0,8), estão adequados para o desenvolvimento do jundiá Piedras et al. (2004). Os resultados de desempenho de crescimento dos juvenis de jundiá, com a inclusão de diferentes níveis de aflatoxinas e de adsorventes (ASSCA e GM), estão apresentados na tabela 2. Os resultados da análise estatística indicam que houve diferença significativa dentro dos tratamentos, para peso final (P=0,0001) e TCE (P=0,0004) em relação ao tratamento controle. Os juvenis de jundiá alimentados com uma dieta contendo aflatoxinas (50 e 100 μgAFkg-1) sem ADS, apresentaram redução gradual do ganho de peso conforme o aumento nos níveis de aflatoxinas com redução em torno de 26,6% no maior nível de inclusão das aflatoxinas (100 μgAFkg-1). Não apresentando mortalidade dos peixes ao longo do período experimental.
Tabela 2. Resultados de crescimento aos 60 dias, dos juvenis de jundiá (Rhamdia quelen) alimentados com rações contendo diferentes níveis de aflatoxinas, aluminosilicato e glucomanano, Pelotas-RS, 2007.
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A redução observada de crescimento dos animais alimentados com 50 e 100 μgAFkg-1 na ração nesse experimento, está de acordo com Roberts; Sommerville (1982 apud CONROY, 2000), quando descreveram que tilápias alimentadas com níveis acima de 100ppb de aflatoxinas B1 e B2 apresentaram crescimento reduzido. Resultados semelhantes também foram encontrados por Tuan et al. (2002) com níveis de inclusão de 100 ppm de aflatoxina B1 kg-1 na dieta de alevinos de tilápias (Oreochromis niloticus), observaram acentuada redução do ganho de peso, porém, apresentaram mortalidade. Aranas et al. (2002) também notaram redução de ganho de peso em alevinos de tilápias (Oreochromis niloticus), com níveis de 80 μgAFkg-1 na dieta. Entretanto, Lopes et al. (2005) ao conduzirem um experimento com alevinos de jundiá (Rhamdia quelen) verificaram a diminuição de ganho de peso, com inclusão de 204 μgAFkg-1 na dieta, por 45 dias experimentais.
Os resultados de biomassa e ganho de peso diário também apresentaram diferença significativa (P=0,0001) quando alimentados com dietas contendo aflatoxinas (50 e 100 μgAFkg-1), comparados com o tratamento controle. Entretanto, não ocorreu diferença significativa para rendimento de carcaça, e sobrevivência, dentro dos tratamentos (Tabela 3). Resultados semelhantes foram encontrados em alevinos de jundiá (Rhamdia quelen) por Lopes et al. (2005), que verificaram a diminuição de ganho médio diário, com nível de inclusão de 204 μgAFkg-1 na dieta experimental. Estes autores relatam que não houve diferença significativa para rendimento de carcaça e sobrevivência. Para alevinos de tilápia dose menor de aflatoxinas na dieta (5 μg) apresentou efeito negativo sobre o desempenho zootécnico de alevinos de tilápia (CONROY, 2000). Manning et al. (2005) ao alimentarem alevinos de channel catfi sh (Ictalurus punctatus) com 20 μgAFkg-1 numa dieta prática, observaram que não houve diminuição no ganho de peso, consumo alimentar e demonstrando ser uma espécie resistente a toxina. Resistência à intoxicação por aflatoxina, também foram relatados por Sahoo; Mukherjee (2002) ao injetarem aflatoxinas intramuscular (1,25 mgAfkg-1 em cada peixe) por 60 dias em alevinos de carpa indiana (Labeo rohita), não observaram mortalidade, entretanto, verificaram redução do ganho de peso. A biomassa também apresentou diferença significativa (P=0,0001) em relação ao tratamento controle sem aflatoxina e quando adicionado o ADS com glucomanano na dieta dos juvenis, foi possível observar que houve uma ligeira melhora no desempenho zootécnico dos animais em relação ao ASSCA (Tabela 3). Resultados da diminuição de biomassa foram encontrados por Chávez-Sánchez et al. (1994), que observaram durante os primeiros 25 dias, o efeito da inclusão de aflatoxinas (7,52, 15 e 30 mgAFB1 kg-1) na dieta de alevinos de tilápia (Oreochromis niloticus) uma diminuição no consumo alimentar, onde biomassa do tratamento controle representa 20 vezes mais do que o peso inicial (P<0,01). Lopes et al. (2005) também observaram queda acentuada na biomassa quando submeteram os alevinos de jundiá a dieta com altos níveis de aflatoxinas.
Tabela 3. Desempenho zootécnico dos juvenis de jundiá (Rhamdia quelen) após 60 dias experimentais alimentados com dieta contendo aflatoxinas, aluminosilicato e glucomanano, Pelotas-RS, 2007.
Efeito dos adsorventes sobre o desempenho de Juvenis de Jundiá (Rhamdia quelen) alimentados com dietas contaminadas com aflatoxinas - Image 3
Os valores observados para rendimento de carcaça entre os tratamentos não apresentaram diferença significativa (P>0,05) para todos os tratamentos propostos, ficando em torno de 79,46%. Semelhantes resultados foram descritos por Lopes et al. (2005) com valores de 204 μgAFkg-1 para alevinos de jundiá num sistema semelhante de criação, encontrando 82,16% no rendimento de carcaça.
Em relação à sobrevivência nesse experimento, pode-se afirmar que os alevinos de jundiás apresentam uma alta resistência a intoxicação por aflatoxinas. Resultado semelhante foram encontrados por Lopes et al. (2005), com jundiá intoxicados por 45 dias experimentais, com níveis entre 41 a 204 μgAFkg-1, obtendo 100% de sobrevivência. Entretanto, Chavez-Sanchez et al. (1994), com inclusão de aflatoxina até 20 mgAFkg-1 na dieta de alevinos de tilápias após 25 dias experimentais, observaram elevada mortalidade. Tuan et al. (2002) também notaram mortalidade de 60% em alevinos de tilápias alimentados por 8 semanas com 100 mgAFkg-1. Entretanto Farabi et al. (2006) observaram mortalidade de 8,6% quando alimentaram juvenis de Huso huso com dieta contaminada com 10 μgAFkg-1, num período de 40 dias.
Os tratamentos com aflatoxinas e com inclusão do adsorvente glucomanano (GM) nas dietas dos juvenis de jundiá apresentaram diferença significativa para peso fi nal, TCE, biomassa e ganho de peso diário entre os tratamentos quando contrastados por níveis de inclusão semelhante (Tabela 3).
Os resultados observados indicam que os tratamentos que continham o adsorvente glucomanano melhorou os índices zootécnicos dos animais em relação aos tratamentos que apresentavam o adsorvente aluminosilicato de sódio e cálcio e também aos tratamentos sem adsorventes, não diferindo com os tratamentos controle (sem AFs e ADS) na dieta. Os tratamentos com 50 μgAFkg-1 e 0,3% de GM foi 28,4% (P<0,05) melhor do que o que continha ASSCA para peso final, TCE, GPD e biomassa dos animais. Os tratamentos com 100 μgAFkg-1 e 0,3% de GM também demonstrou-se 17,9% melhor na adsorção das aflatoxinas, contribuindo no desempenho satisfatório dos animais intoxicados (P<0,05), para peso final, TCE, GPD e biomassa em relação aos tratamentos com ASSCA, não diferindo do tratamento controle (sem AFs e ADS).
Resultados semelhantes foram encontrados por Swamy et al. (2002) com adição de 0,2% de GM na dieta de suínos contaminadas com micotoxinas do genero Fusarium, para peso corporal e crescimento. Ellis et al. (2000) testando adsorvente (bentonita sódica) em juvenis de truta (Oncorhynchus mykiss) alimentadas com dietas contendo 20 μgAFkg-1, afirmaram que a inclusão de 2% de ADS na dieta reduz significativamente a absorção da aflatoxina pelo organismo animal.
Segundo Uhida et al. (2000) os benefícios da utilização do adsorvente na ração em relação ao ganho de peso e conversão alimentar ainda não são bem definidos, sendo que a necessidade de utilizar nível de inclusão alto (6%) e que para outros organismos monogástricos, nível de 2% de bentonita sódica na dieta não foram o suficiente para adsorver as micotoxinas. Embora, Tomasevic- -Canovic et al. (2003) afirmaram que a preparação e o processo de elaboração e inclusão do adsorvente na dieta, influência na absorção das micotoxinas.
Ao longo dos 60 dias do experimento observou-se algumas características morfológicas nos juvenis que receberam dieta contaminada (50 e 100 μgAFkg-1) como despigmentação parcial da pele, próximo ao pedúnculo caudal. Sinais de aflatoxicose também foram observados por Farabi et al. (2006) com juvenil de Huso huso em dietas contaminadas com aflatoxinas. Entretanto, alevinos de tilápia-do-Nilo (Oreochromis niloticus) alimentados com uma dieta contaminada com aflatoxinas (75 e 100 μgAF kg-1) não apresentaram anormalidade morfológica e não ocorreu mortalidade ao final de 12 semanas experimentais (LIM et al., 2001). Embora, podem aparecer sinais clínicos, sintomas e um quadro patológico específico, dependendo da micotoxina ingerida, da susceptibilidade das espécies, das condições individuais do organismo e interações ou não com outros fatores (MALLMANN et al., 2007).
 
CONCLUSÕES
A ingestão de aflatoxinas influenciou negativamente o crescimento dos juvenis de jundiá; o adsorvente a base de glucomanano reduziu satisfatoriamente a ação das aflatoxinas contribuindo com o desenvolvimento dos peixes estudados.
 
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Informação bibliográfica: Vet. Not., Uberlândia, v. 16, n. 1, jan./jun. e n. 2, p. 13-21.
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Autores:
CA Mallmann
LAMIC - LABORATÓRIO DE ANÁLISES MICOTOXICOLÓGICAS
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Paulo Rodinei Soares Lopes
UNIPAMPA - Universidade Federal do Pampa
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